HS PCR Master Mix Long Range, Taq polymérase

HS PCR Long Range Master Mix est une solution prête à l’emploi comprenant une Taq polymérase hot start ainsi qu’une polymérase Pfu et tous les éléments nécessaires pour la PCR, y compris les dNTPs ultra purs. (l’ADN matrice et les amorces ne sont pas inclus)

La solution de tampon de l’association Taq polymérase / polymérase Pfu a été particulièrement travailler afin de mettre à profit l’activité exonucléase 3’ 5’ (proofreading) de la polymérase Pfu tout en préservant la vitesse de synthèse de la Taq polymérase.

Cette amélioration par rapport à un tampon de Taq polymérase conventionnelle autorise l’amplification de fragments d’ADN de jusqu’à 25 kpb.

La Taq polymérase qui entre dans la composition du HS PCR Long Range Master Mix a en grande partie conservée son activité terminal transférase, ajoutant une adénine à l’extrémité 3’ de l’amplicon. Une extrémité 3’-dA sortante est dès lors disponible pour une utilisation en clonage par vecteur T.

Le HS PCR Long Range Master Mix dispose également d’une propriété hot start inhibant toute activité enzymatique avant activation de celle-ci. Cette particularité améliore considérablement la spécificité de la PCR en limitant l’extension, à basse température, d’amorces hybridées de façon non spécifique.

L’absence d’activité a faible température autorise, de plus, la préparation des essais PCR à température ambiante. L’activation de la polymérase sera ensuite réalisée en seulement 5 min par chauffage à 95 °C.

Par ailleurs, l’utilisation d’un mélange de type master mix diminue non seulement le temps de préparation, mais réduit également le nombre d’étapes de pipetage et limite donc le risque de contaminations croisées. Ces avantages assurent une meilleure reproductibilité des résultats et contribuent à faciliter la réalisation de la PCR.

Le HS PCR long Range Master Mix se présente sous forme d’une solution concentrée 2X et est destiné à être utiliser dans des milieux réactionnels entre 20 et 50 µl. Il est compatible avec tous les types de PCR de routine et convient parfaitement à la PCR en haut débit (high-throughput PCR), aux séquences riches en GC ou aux zone difficilement accessibles.

Conditionnement :

Réf. : 3050.800

800 réactions, selon le protocole à respectivement 20 µl de milieu réactionnel